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过敏性结膜炎通过临床表现如眼睛充血发红、眼睛痒越揉越痒、结膜炎特征以及有关的实验室检查就可以明确诊断。检查过敏源方法多种，根据病情决定选择适宜方法就可以明确。

细胞学检查通过结膜物涂片或者刮片有助于明确过敏性结膜炎，过敏性结膜炎活检中可见嗜酸性和嗜碱性粒细胞，结膜涂片数量很少。春季卡他性结膜炎其上皮细胞中可见大量嗜酸性颗粒。

泪液检查，过敏性结膜炎患者泪液中可以检出嗜酸性粒细胞分泌的蛋白产物。

过敏性结膜炎的过敏源可以通过班贴试验、点刺试验以及划破试验、皮内试验等方法检查。

班贴试验是根据受试物的性质配制适当浓度的溶液、浸液、软膏等，以适当方法将其贴敷预皮肤，通过一定时间观察皮肤反应，适用于接触性过敏性结膜炎的过敏源检查。

点刺试验一般选择前臂屈侧为受试部位，局部清洁消毒，按照说明书点试液以及点刺，5～10分钟后拭去试液，20～30分钟观察试验结果就可以明确过敏源。

过敏性结膜炎的过敏源一般分为外源性、内源性，植物花粉、枯草败叶、房屋粉尘、虫螨、羽毛、皮屑、棉麻等过敏源最常见，一旦脱离过敏原症状体征立即消失。 内源性过敏性结膜炎，过敏源一般是微生物蛋白质过敏，常见微生物是结核杆菌、金黄色葡萄球菌等。