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中东呼吸综合征 (MERS) 是由中东呼吸综合征冠状病毒 (MERS-CoV) 引起的一种严重的呼吸系统疾病, 是继严重急性呼吸综合征冠状病毒 (SARS-CoV) 后一种新发现的传播力强、病死率高、可感染人的冠状病毒。自2012年在沙特首次被发现以来, 感染病例不断增加, 病死率远高于SARS-CoV的病死率, 感染地区有27个国家之多, 其中82%的病例主要集中在沙特阿拉伯国家。
MERS-CoV病毒属于冠状病毒科, 病毒基因组为线性非节段单股正链RNA球状病毒, 含upE、ORF1b以及Nseq等基因, 与SARS-CoV基因组相似性为55%左右。
那么针对MERS-CoV的检查项目都有哪些呢？今天我们来大致了解一下。
目前, 针对MERS-CoV病毒的检测方法主要有荧光RT-PCR法、LAMP法等, 其中荧光RT-PCR法灵敏度高、特异性好, 但检测时间长、操作要求高、设备投入大;LAMP法操作简单, 不需特别设备, 可在现场开展检测, 但引物设计复杂、灵敏度不高、特异性不强。而逆转录重组酶介导检测方法 (RT-RAA) 是通过设计RAA引物, 采用源于细菌或真菌的重组酶, 并结合RNA逆转录酶以及DNA聚合酶, 代替了PCR高温变性循环过程, 从而实现了在37oC~39oC常温条件下, 快速、灵敏检测目的基因片段。在RT-RAA反应过程中, RNA首先通过反转录酶合成cDNA, 通过重组酶完成对双链的解链, 解开的双链被单链结合蛋白结合, 再由DNA聚合酶完成链的延伸, 以cDNA为模板合成目的产物。RT-RAA方法灵敏度高、特异性好、检测时间短、操作简便、不需昂贵仪器, 如果结合荧光探针, 能够实现实时检测以及现场快速检测。
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