胚胎体外培养的过程中,卵子和精子在形成新生命的种子之前,需要经过四次检阅:1)采卵后观测2)对卵子做前培养3)选择成熟卵子进行受精,受精卵在第二天分裂为四细胞4)第五天和第六天会继续成长为囊胚。
(一)初期胚[受精后2-3天]级别
受精卵在受精后第二/三天会发育成为4细胞/8细胞初期胚。分裂的时候,细胞呈现圆形、越规则就越好。如果细胞不是紧密排列在一起,而是排列分散或细胞坏死,就说明受精卵质量不好。受精卵碎片越多,质量就越不好,等级的数值也就越大。
初期胚的级别从均匀度和碎片率分为G1到G5。G1为最佳,一颗初期胚的怀孕率可达20-30%。
G1:分裂均匀、没有碎片
G2:分裂均匀、碎片小于整个体积的10%
G3:分裂不均匀、碎片小于整个体积的10%
G4:分裂不均匀、碎片体积在10~50%
G5:分裂不均匀、碎片体积在50%以上
除了级别外,4Cell和8Cell代表什么?
—— 4Cell即四细胞,4Cell和8Cell代表受精卵的分裂速度,在同一个时间细胞数越大说明分裂速度越快,也就更好。
什么叫 “卵子受精后不分裂” ?
—— 在自然受精或显微受精情况下,最健壮的精子会自行进入或被注射到卵子中。正常情况下卵在受精后会开始裂变,首先分裂成两个原核。如果没有开始分裂,只有物理注入,受精卵就没有在继续生长,这种叫“受精卵不分裂”。
什么叫 “受精卵异常分裂,单核或三核” ?
—— 正常卵子受精后,在分裂初期会形成两个原核。如果出现单核1PN或者三核3PN,都属于分裂异常。我们会记录这个异常,但同时会继续培养。单核受精卵依然有3%的概率可正常发育为囊胚。
什么叫 “未达到冻结标准,继续培养” ?
—— 通过评估胚胎解冻后成活的可能性,英医院有冷冻标准,例如一颗4细胞G3的初级胚到达冷冻标准可以进行冷冻,但是G4的胚胎按英医院标准就不再进行冷冻,会继续培养观测,G4的胚胎培养到囊胚的可能性虽然小但也还是有的。
(二)囊胚[受精后5-6天]级别
在受精后5-6天,胚胎会发育到囊胚阶段。囊胚按照细胞的密度和孵化程度分为G1到G6级,G6为最佳。G2级以上的囊胚不但有数字区分,而且后面还带有2个字母,第1个字母表示将来发育成胎儿的内细胞团的质量,第2个字母表示将来发育成胎盘的外细胞团的质量。质量等级最好为A,依次为B、C。
第一个数字代表发育快慢:
囊胚级别从内细胞团和外细胞团的密度分为G1到G6,G6为最佳。
G1=Early blastocyst 早期囊胚(囊胚腔小於1/2大小)
G2=Early blastocyst 囊胚(囊胚腔大於1/2大小)
G3=Full blastocyst完全囊胚
G4=Expanded blastocyst 擴張的囊胚
G5=Hatching blastocyst 孵化中囊胚
G6=hatched blastocyst 完全孵化囊胚
第二个字母代表胎儿部分质量,即内细胞团分级:A级,细胞数目多,排列紧密;B级,细胞数目少,排列松散;C级,细胞数目很少。第三个字母代表胎盘部分质量,即滋养层细胞分级:A级,上皮细胞层由较多的细胞组成,结构致密;B级,上皮细胞层细胞不多,结构松散;C级,上皮细胞层稀疏。
级别后面两个字母只对于2级以上的囊胚有效,因为3级以上才能够明显区分胎儿和胎盘的区域,所以同样是G3,G3Aa的囊胚又比G3Bb的质量要好。在英医院,3级以上的优质囊胚一次移植的成功率高达60-70%。
什么叫“培养终止”?
—— 受精卵在往囊胚发育的过程中,自行停止了分裂和生长,经过一段时间观测后,就会放弃培养。根据患者的不同年龄段,囊胚培养的成功率平均在30%-50%之间。