不规则抗体的检测与临床输血的安全性和有效性密切相关。随着输血技术的发展,不规则抗体的检测方法不断丰富、检测水平不断提高,越来越多的不规则抗体被发现。输血技术人员有必要深入了解不规则抗体的重要性。
什么是不规则抗体
是指不符合ABO血型系Landsteiner法则的抗体，包括ABO亚型抗体和非ABO血型抗体，多为免疫性抗体（IgG抗体）。
人的血型抗体有IgG和IgM两类。现在所知ABO血型系统的抗-A，抗-B是IgM型，其它血型系统的抗体都是IgG型。IgM型抗体在盐水介质中能与含相应抗原的红细胞发生肉眼可见的凝结（传统ABO血型鉴定）。而IgG型抗体在盐水介质中只能使相应抗原的红细胞致敏，不能使红细胞凝结。IgG型抗体与相应的红细胞反应必须借助酶学试验或抗人球蛋白试验才能发生肉眼可见的凝结。也就是说传统的盐水血型鉴定和交叉配血试验只对ABO血型系统有效，而对其它多种血型系统无效。
不规则抗体检查原理与方法
原理：利用筛选细胞上存在的多种红细胞抗原与被检血清反应，如果出现凝集表示血清中存在不规则抗体；
方法：盐水凝集试验、抗人球蛋白试验、酶试验、聚凝胺试验等。
为什么要作不规则抗体筛查
不规则抗体主要是经输血或妊娠等免疫刺激产生，在盐水介质中不能凝集而只能致敏相应抗原的红细胞，必须通过特殊介质才能使致敏红细胞出现凝集反应。
临床上通常所称的“同型血”实际上是指ABO血型系统和Rh血型系统相同，其它红细胞血型系统未必相同。如果交叉配血不仔细，或者只用盐水介质配血，则有可能检查不出ABO血型系统之外的不规则抗体，而此抗体与相应抗原发生免疫反应，可导致溶血性输血反应的发生。
不规则抗体筛查的临床意义
一、虽然不规则抗体筛选阳性率并不高，但是若不规则抗体阳性的患者一旦输入具有相应抗原的红细胞，抗原抗体就会免疫性结合，在补体的参与下，使输入的红细胞溶解破坏，发生溶血性输血反应。临床上患者会出现发热、贫血、黄疸和血红蛋白尿等症状，严重时危及生命。因此，在输血中要经常警惕这种输血反应发生的可能性。当不规则抗体筛选阳性时，必须进一步作抗体鉴定，确定其特异性后，再输入无相应抗原的红细胞，才能达到安全输血之目的。
二、新生儿溶血病（HDN）是指母婴血型不合而引起的胎儿或新生儿免疫性溶血。凡是以IgG性质出现的不规则抗体，理论上都可以引起HDN，因为多数IgG性质抗体能通过胎盘进入胎儿血循环，破坏胎儿红细胞，引发胎儿水肿、黄疸、贫血和肝脾肿大，甚至并发核黄疸。因此对有输血史或妊娠史的孕妇应作不规则抗体筛查，若检测出不规则抗体，应作出相应的预防和治疗。
三、Rh血型中D抗原的抗原性强于E抗原的抗原性，因此产生抗D抗体的几率大于抗E抗体。抗 A1抗体为A亚型中不规则抗体，它的存在提示我们在注意ABO血型以外的不规则抗体的同时，也应高度重视ABO亚型中的不规则抗体，因为它也是引起溶血性输血反应的一个因素。
四、抗M抗体为冷凝集素，很少在37℃有活性，一般在体内不能引起溶血反应，但患者处于低温麻醉状态下手术时应注意，因为此类抗体可激活补体。当机体的体温在冷抗体最适反应温度范围内(4～20℃)时，可发生溶血反应。
不规则抗体筛查的重要性
不规则抗体是引起溶血性输血反应和新生儿溶血病的主要因素之一，对输血发生溶血性反应所引起肾衰、死亡病例的诊断有临床意义。因此为了保证输血安全，提高输血疗效，减少或杜绝溶血性输血反应的发生，不规则抗体检查必须作为输血前检查的重要项目之一。其重要性可见于下面三个方面。
一、献血者的血清或血浆进行抗体筛查，可以防止含有不规则抗体的血液输注给病人，避免由于献血者血液中的不规则抗体引起病人红细胞的破坏而引起的溶血性输血反应，同时可以减少血液浪费，可将有不规则抗体的血液制备成抗体血清，用于稀有血型的检测。
二、对需要输血治疗的患者，进行不规则抗体筛查，可以有助于血液选择，从而有充分的时间来选择不含有针对某抗体的响应抗原的血液，从而防止因为输注含有某抗体相应抗原的血液而引起溶血性输血反应，保证输血安全。
三、孕妇进行不规则抗体筛查，可以尽早发现不规则抗体，可以在孕期进行新生儿溶血病的预防和治疗，减少不规则抗体对胎儿或新生儿带来的伤害，减轻新生儿溶血病的性病程度，提高胎儿或新生儿的身体素质。
不规则抗体筛查的重要性及临床应用
不规则抗体的检测与临床输血的安全性和有效性密切相关。随着输血技术的发展,不规则抗体的检测方法不断丰富、检测水平不断提高,越来越多的不规则抗体被发现。因此,输血技术人员有必要深入了解不规则抗体的重要性
什么是不规则抗体?是指不符合ABO血型系Landsteiner法则的抗体，包括ABO亚型抗体和非ABO血型抗体，多为免疫性抗体（IgG抗体）。人的血型抗体有IgG和IgM两类。现在所知ABO血型系统的抗-A，抗-B是IgM型，其它血型系统的抗体都是IgG型。IgM型抗体在盐水介质中能与含相应抗原的红细胞发生肉眼可见的凝结（传统ABO血型鉴定）。
而IgG型抗体在盐水介质中只能使相应抗原的红细胞致敏，不能使红细胞凝结。IgG型抗体与相应的红细胞反应必须借助酶学试验或抗人球蛋白试验才能发生肉眼可见的凝结。也就是说传统的盐水血型鉴定和交叉配血试验只对ABO血型系统有效，而对其它多种血型系统无效。
不规则抗体检查原理与方法原理：利用筛选细胞上存在的多种红细胞抗原与被检血清反应，如果出现凝集表示血清中存在不规则抗体；方法：盐水凝集试验、抗人球蛋白试验、酶试验、聚凝胺试验等。
为什么要作不规则抗体筛查不规则抗体主要是经输血或妊娠等免疫刺激产生，在盐水介质中不能凝集而只能致敏相应抗原的红细胞，必须通过特殊介质才能使致敏红细胞出现凝集反应。临床上通常所称的“同型血”实际上是指ABO血型系统和Rh血型系统相同，其它红细胞血型系统未必相同。如果交叉配血不仔细，或者只用盐水介质配血，则有可能检查不出ABO血型系统之外的不规则抗体，而此抗体与相应抗原发生免疫反应，可导致溶血性输血反应的发生。
不规则抗体筛查的临床意义一、虽然不规则抗体筛选阳性率并不高，但是若不规则抗体阳性的患者一旦输入具有相应抗原的红细胞，抗原抗体就会免疫性结合，在补体的参与下，使输入的红细胞溶解破坏，发生溶血性输血反应。临床上患者会出现发热、贫血、黄疸和血红蛋白尿等症状，严重时危及生命。因此，在输血中要经常警惕这种输血反应发生的可能性。当不规则抗体筛选阳性时，必须进一步作抗体鉴定，确定其特异性后，再输入无相应抗原的红细胞，才能达到安全输血之目的。
二、新生儿溶血病（HDN）是指母婴血型不合而引起的胎儿或新生儿免疫性溶血。凡是以IgG性质出现的不规则抗体，理论上都可以引起HDN，因为多数IgG性质抗体能通过胎盘进入胎儿血循环，破坏胎儿红细胞，引发胎儿水肿、黄疸、贫血和肝脾肿大，甚至并发核黄疸。因此对有输血史或妊娠史的孕妇应作不规则抗体筛查，若检测出不规则抗体，应作出相应的预防和治疗。
三、Rh血型中D抗原的抗原性强于E抗原的抗原性，因此产生抗D抗体的几率大于抗E抗体。抗 A1抗体为A亚型中不规则抗体，它的存在提示我们在注意ABO血型以外的不规则抗体的同时，也应高度重视ABO亚型中的不规则抗体，因为它也是引起溶血性输血反应的一个因素。
四、抗M抗体为冷凝集素，很少在37℃有活性，一般在体内不能引起溶血反应，但患者处于低温麻醉状态下手术时应注意，因为此类抗体可激活补体。当机体的体温在冷抗体最适反应温度范围内(4～20℃)时，可发生溶血反应。
不规则抗体筛查的重要性不规则抗体是引起溶血性输血反应和新生儿溶血病的主要因素之一，对输血发生溶血性反应所引起肾衰、死亡病例的诊断有临床意义。因此为了保证输血安全，提高输血疗效，减少或杜绝溶血性输血反应的发生，不规则抗体检查必须作为输血前检查的重要项目之一。其重要性可见于下面三个方面。
一、献血者的血清或血浆进行抗体筛查，可以防止含有不规则抗体的血液输注给病人，避免由于献血者血液中的不规则抗体引起病人红细胞的破坏而引起的溶血性输血反应，同时可以减少血液浪费，可将有不规则抗体的血液制备成抗体血清，用于稀有血型的检测。
二、对需要输血治疗的患者，进行不规则抗体筛查，可以有助于血液选择，从而有充分的时间来选择不含有针对某抗体的响应抗原的血液，从而防止因为输注含有某抗体相应抗原的血液而引起溶血性输血反应，保证输血安全。
三、孕妇进行不规则抗体筛查，可以尽早发现不规则抗体，可以在孕期进行新生儿溶血病的预防和治疗，减少不规则抗体对胎儿或新生儿带来的伤害，减轻新生儿溶血病的性病程度，提高胎儿或新生儿的身体素质。
微柱凝胶法不规则抗体检测的临床应用
为确保临床输血安全,输血前要用能够检测不完全抗体的方法筛查不规则抗体,本院从2004年6月起,运用微柱凝胶技术对需输血的患者提前筛查不规则抗体,确保了输血安全,保证了临床治疗的顺利进行,现报告如下。
1、?材料与方法1. 1 ?试剂与仪器? 抗球蛋白试剂、IgG抗D血清、不规则抗体筛查细胞均由上海血液中心供应;微柱凝胶工作测试系统由长春博迅公司提供。1.2 ?标本来源? 选择本院2004年6月―2005年12月3 600例需输血的住院患者,其中男2 000例,女1 600例;内科输血1 303例,外科手术2 297例。1.3 ?微柱凝胶试验? 向标示好Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的3个微柱凝胶管中加50μl备检血清,再加50μl 0.5%相应筛检红细胞,置37℃孵育10min;取出置专用水平离心机离心5min,观察结果:红细胞全部沉于微柱底部者为阴性,聚于微柱上面者为阳性(将阳性血清再用间接抗球蛋白试验确证)。1.4 ?抗球蛋白试验(试管法)? 取5支标识好Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、阳性对照、阴性对照的试管,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ管加5%相应筛检红细胞2滴和被检血清2滴,阳性对照管加5%Rh(D)阳性红细胞和IgG抗D血清各2滴,阴性对照管加5% Rh(D)阳性红细胞和AB型血清各2滴;各管37℃孵育1h后用生理盐水洗涤3次,再加抗球蛋白试剂2滴,2 000r/min离心1min,观察结果:当阳性对照管和被检管出现凝集,而阴性对照管不凝集时,即为阳性,说明血清中有不规则抗体存在。
2、?结果用微柱凝胶试验筛查不规则抗体,3 600例中有9例阳性,并经间接抗球蛋白试验确证,其中男4例,女5例(表1)。用排除法并通过抗体特异性鉴定:1～3号患者血清中有抗D;4~7号患者血清中有抗E;8号患者血清中有抗c;9号患者血清中有抗e。经询问4例男性均有输血史(2例有抗E、1例有抗D、1例有抗c),2例女性只有输血史(有抗E),2例女性只有妊娠史(均有抗D),1例女性既有输血史又有妊娠史(1例有抗E、1例有抗e)。9名阳性不规则抗体者有5人为择期手术患者:2例通过自身输血顺利完成手术;2例用微柱凝胶法配出相合悬浮红细胞输注。
3、?讨论我们采用微柱凝胶试验筛查不规则抗体,检出率为0.25%(9/3 600),与美国0.3%～2.0%的报道相似,稍高于日本0.16%的报道［1］,并全部为抗球蛋白法所证实。微柱凝胶试验简便快速、灵敏度高［2］,结果稳定可靠容易判断,标本用量少、易标准化,适用于临床常规不规则抗体筛检。须指出的是为不影响结果判断该试验要用新鲜血清标本。9例中7例有输血史或妊娠史,提示此类患者输血前作不规则抗体筛检尤为重要。不规则抗体多为免疫性不完全抗体,可通过胎盘影响胎儿,妊娠妇女施行不规则抗体筛检并鉴定抗体特性,可预测新生儿溶血病,为此本院已将不规则抗体筛检列为产前血型血清学检查常规项目。对手术受血者的不规则抗体筛查由于是在输血前3d内进行,筛检出阳性抗体者可以有充裕的时间鉴定其特异性,选择相配合的血液输注,一旦找不到相配合的血液,还可选择自身输血,因此可避免手术中患者急需输血时没有相合血液而措手不及。5例择期手术患者均术后恢复良好,全部康复出院。对于连续输血患者,有学者［3］主张3d筛检1次,以防止开始效价很低不易检出,但经过输血刺激,回忆性抗体效价迅速升高而引起溶血反应。筛检用谱细胞不可能包含所有抗原,对一些低频率抗原相应抗体不能检出,因此“不规则抗体筛查阴性”并不等于完全没有不规则抗体;对ABO血型的误判,也不能通过抗体筛查纠正查出。因此即使不规则抗体筛查阴性,还必须用能快速检测出不完全抗体的方法交叉配血,以确保输血万无一失。
参考文献
［1］? 孔令宜.红细胞检查［M］//孔令宜,马三科,马长仁,等.成份输血与临床应用.沈阳:辽宁科技出版社,1994:369-429??
［2］? 李沙,郑山根,欧阳锡林,等.柱凝集技术不规则抗体的初步观察［J］.中国输血杂志,1999,12(3):168??
［3］? 胡永红,李勇.抗体检测和鉴定［M］//李勇,杨贵贞.人类红细胞血型学实用理论与实验技术.北京:中国科学技术出版社,1999：139-157